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支原體污染解決方案

支原體是一種類似細菌但不具有細胞壁的原核微生物，直徑在 50-300 nm，可輕松通過一般濾膜（0.22 μm）混入培養(yǎng)系統(tǒng)中，普通的抗生素（如培養(yǎng)細胞常用的雙抗）對它不起作用。支原體以寄生和共生方式存活，部分可能導致動物、植物宿主的病變。

支原體是細胞污染物中比較常見的一種，來源廣泛，常見的主要來自培養(yǎng)試劑、人員操作、細胞間交叉污染及組織來源。受支原體污染的細胞生長會變慢，狀態(tài)會變差，雖不會馬上使細胞致死，但卻會影響細胞內(nèi)的各種參數(shù)，如改變細胞膜抗原性，改變細胞新陳代謝，干擾核酸的合成，改變 DNA 轉(zhuǎn)染效率，導致染色體畸變等，這些影響會造成實驗結(jié)果不準確，重復性差，甚至得出錯誤的結(jié)論。2013年業(yè)界頂級期刊《Nature》已正式要求投稿的文章如涉及細胞培養(yǎng)，都必須要進行支原體檢測。此外，支原體污染檢測也是生物藥研發(fā)與生產(chǎn)的重要質(zhì)控指標，必須在生物藥產(chǎn)品開發(fā)的各個階段進行，包括原材料、細胞庫、病毒種子庫、未加工的收獲液材料和最終產(chǎn)品。

常見的支原體檢測方法

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支原體不僅僅會影響細胞狀態(tài)，在實驗過程中受污染的支原體會成為感染源可以感染其它細胞，因此支原體的去除與預防也至關(guān)重要。全式金推出快速、高效的支原體檢測試劑，高去除率、低毒性的去除試劑及使用方便、可替代雙抗的預防試劑，全方位助力消除支原體污染。

支原體檢測

TransDetect^? PCR Mycoplasma Detection Kit (FM311)

本產(chǎn)品通過 PCR 方法檢測培養(yǎng)細胞等生物材料中的支原體，針對支原體 16S rRNA 序列保守區(qū)域設(shè)計特異引物，直接使用細胞培養(yǎng)液作為模板，特異性擴增支原體 DNA，具有操作簡便、快速（2 小時內(nèi)即可出結(jié)果）、特異性強、靈敏度高的特點。

? 靈敏度高，可檢測到低至 20 個拷貝的支原體 DNA。

? 特異性強，只擴增支原體 DNA，真核細胞和細菌 DNA 不被擴增。

? 操作簡便，無需提取基因組 DNA，適合大量細胞樣品的檢測。

? 配有陽性對照與陰性對照，保證 PCR 檢測結(jié)果的準確性。

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TransDetect^? Luciferase Mycoplasma Detection Kit (FM301)

本產(chǎn)品利用支原體中所特有的酶設(shè)計而成，該酶分解 MycoDetect Substrate 的同時將 ADP 轉(zhuǎn)換成ATP，熒光素酶在 ATP 存在的條件下催化熒光素（luciferin）氧化發(fā)出生物熒光，通過檢測生物熒光可以表征細胞培養(yǎng)物是否存在支原體污染。由于檢測的是真正具有生物活性的支原體，所以得到的結(jié)果比 PCR 檢測方法更加準確。該方法靈敏度高、操作簡便、省時。

靈敏度高，可檢測高倍稀釋的陽性樣本

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結(jié)果判斷準確率高

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TransDetect^? qPCR Mycoplasma Detection Kit (FM321)

本產(chǎn)品采用TaqMan實時熒光定量PCR法檢測支原體DNA，用于定性檢測如培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)物、生物制品等樣品中的支原體污染?？蓹z測的支原體種類涵蓋范圍廣，包括柔膜菌綱（Mollicutes）下的多種支原體（Mycoplasma spp.）、無膽甾原體（Acholeplasma spp.）、螺原體（Spiroplasma spp.）等。本試劑盒按照EP 2.6.7和JP G3支原體檢測相關(guān)指南和要求進行驗證。? 支原體種類覆蓋范圍廣：已驗證13 株菌株及質(zhì)粒DNA 的支原體檢測，數(shù)據(jù)庫比對可覆蓋至少129 種支原體DNA 序列。

? 靈敏度高：驗證的支原體滿足95% 的檢出要求，檢測限可達10 CFU/mL；質(zhì)粒標準品可達1 copy/μL。

? 特異性高：常見的近20 種細菌、生產(chǎn)用細胞等基因組無檢測干擾。

? 穩(wěn)定性高：產(chǎn)品至少可凍融15 次，產(chǎn)品性能無明顯影響。

? dUTP/UDG 防污染系統(tǒng)：有效防止PCR 產(chǎn)物的污染，數(shù)據(jù)準確。

? 儀器兼容性廣：主流qPCR 檢測儀器均可兼容，檢測結(jié)果一致。

靈敏度高

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